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國自然的前期「工作基礎(chǔ)」部分，也是國自然項目判斷延續(xù)性最重要的部分。

需要注意的是，該部分有兩個關(guān)鍵點(diǎn)：

與本項目相關(guān)的研究工作積累

已取得的研究工作成績

那么我們就今年審閱的幾百份標(biāo)書，總結(jié)出來的「工作基礎(chǔ)」問題給大家陳述一下：

（一）預(yù)實驗體量不足

這個問題最為突出，可想而知，本身作為臨床醫(yī)生，科研只是附帶做做，哪有精力跟大家一起「卷」，所以最后形成的本子中的預(yù)實驗，往往只有大量的「生信圖」和少量的柱狀圖、WB 結(jié)果。

而除了精力問題導(dǎo)致預(yù)實驗不足以外，還有一個認(rèn)知問題也很嚴(yán)重，就是申請人設(shè)計的國自然假說太簡單導(dǎo)致，殊不知別人的本子不僅思路「卷」、預(yù)實驗也「卷」，所以這就導(dǎo)致「瞎子摸象」的困局，始終摸不到國自然的「真象」，那么距離國自然中標(biāo)也就十分遙遠(yuǎn)。

為什么預(yù)實驗要足夠多？①專家挑刺時，不會以證據(jù)鏈不足秒殺你；②預(yù)實驗多可以彌補(bǔ)一下「文章不夠好」的短板；③預(yù)實驗多，證明你花了很多經(jīng)費(fèi)，那你并不是白嫖的態(tài)度來對待國自然，專家也能看到你的努力。

有些同學(xué)會問：會不會因為預(yù)實驗多，專家覺得你都做完了而不予資助？

既然國自然本子包含多方面顧慮，存在各種心理維度的博弈，在面對這個問題時，更愿意相信專家喜歡「預(yù)實驗充足」的本子。

兩害相權(quán)取其輕，永遠(yuǎn)是國自然本子的正解。

所以預(yù)實驗應(yīng)該包括 3-4 張組圖：

①　第一張：證明你的細(xì)胞系和動物模型，成功；

②　第二張：生信分析、分子信號軸關(guān)鍵分子和臨床問題的相關(guān)性，驗證關(guān)鍵分子在臨床樣本、細(xì)胞系和動物模型中的表達(dá)趨勢；

③　第三張：過表達(dá)或者沉默干預(yù)后，觀察細(xì)胞和動物模型的表型，檢測一下 XXX 通路的激活情況；

④　第四張：數(shù)據(jù)庫預(yù)測以及分子對接分析；加一個分子互作的實驗圖，證明分子機(jī)制的假說成立。

（二）圖注（legend）不詳實、預(yù)實驗圖模糊不清

字面意思，就是圖注缺失，或者描述過于粗糙，沒有介紹單圖的實驗方法和分組情況。

而有些童鞋的預(yù)實驗圖非常模糊，圖像像素極低，這又不利于專家審閱，不美觀

（三）對照組缺失

對照組包括空白對照、陰性對照、陽性對照，但一般來講，至少要有陰性對照，空白對照可以忽略。陽性對照大部分情況不是必須的，但是藥物實驗中陽性對照卻是必須的。

而過表達(dá)和敲低這種實驗，陰性對照組一定需要，切不可省略。一般用「空白質(zhì)?！埂竤crambles」「sh-NC」「si-NC」「Mock」作為陰性對照組。

（四）內(nèi)參前后文不一致

全細(xì)胞 WB 內(nèi)參一般有 GAPDH、β-actin、β-tubulin 等，但有時候因為代表作屬于早幾年發(fā)表的，所以和現(xiàn)在預(yù)實驗之間的內(nèi)參可能會存在差異，這種都可以理解，但最好是內(nèi)參保持一致。但有時候同一批預(yù)實驗中內(nèi)參也有不一致的情況，還望前后保持一致。

（五）沒有統(tǒng)計顯著性標(biāo)注

預(yù)實驗按理來講都是要做到技術(shù)性重復(fù)和生物學(xué)重復(fù)，因此每個實驗務(wù)必形成一個統(tǒng)計學(xué)分析結(jié)果，并且附帶顯著性標(biāo)注「***」「ns（不具有統(tǒng)計學(xué)意義）」等。

當(dāng)然如果預(yù)實驗太多，可以選擇性進(jìn)行統(tǒng)計分析。

（六）WB 條帶背景不均一或者分子量（kDa）沒標(biāo)注

有些 WB 看起來比較假，因為背景不均衡，不均一，像是不同實驗條件下產(chǎn)生的，而且有時候單圖的邊緣有明顯的的切割的痕跡。

另外一個經(jīng)常出現(xiàn)的問題就是：WB 結(jié)果不標(biāo)注分子量。這不是一個特別規(guī)范的學(xué)術(shù)行為。

（七）分子機(jī)制的結(jié)果缺失

分子機(jī)制的證據(jù)鏈往往成本很高，畢竟 CO-IP、pulldown、ChIP、熒光素酶報告實驗等的成本不低，而且往往做了也不一定有陽性結(jié)果，所以很多本子并沒有放分子機(jī)制的預(yù)實驗結(jié)果圖，這也是很多國自然本子的通病之一。解決方案就是用數(shù)據(jù)庫預(yù)測、motif 預(yù)測、各種炫酷的分子對接分析來彌補(bǔ)了。

（八）腫瘤本子預(yù)實驗只有一株細(xì)胞系

強(qiáng)烈建議腫瘤類的本子，預(yù)實驗中最好使用兩株細(xì)胞系做功能實驗，并且腫瘤類的本子一定含有體內(nèi)實驗。

（九）已取得工作成績部分

已取得工作成績部分要簡明扼要，一般的格式是一段話介紹一下自己的科研經(jīng)歷，可以提一下自己的大牛導(dǎo)師；然后列出自己的代表作文章，并標(biāo)注一下作者位次以及中科院分區(qū)；挑 2-3 篇文章，把重要的實驗結(jié)論（或者文章的機(jī)制圖）放一張出來，簡單描述一下。而有些同學(xué)，把各種實驗圖都抖出來，羅列出 10-20 張小圖，光圖片的序號都排到了十幾，這樣的閱讀感受非常不好，專家讀著累，打分不會太高。

2024 年度國自然醫(yī)學(xué)部 50 大科研熱點(diǎn)中標(biāo)數(shù)統(tǒng)計如下：