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文/華中農(nóng)業(yè)大學(xué)陳昌福，武漢科研時代生物技術(shù)有限公司周鑫軍

正文/4793字

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陳昌福有話說

根據(jù)來自全國各地的部分水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)者的技術(shù)咨詢信息得知，現(xiàn)在有不少水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)者采用我國的“國標(biāo)漁藥”，感到難以有效地治療水產(chǎn)養(yǎng)殖動物的疾病。

因為這類咨詢信息很多，我們也知道藥物能否有效治療患病水產(chǎn)養(yǎng)殖動物的疾病，是與許多因素相關(guān)的。不過，主要原因還是水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)者在藥物治療水產(chǎn)養(yǎng)殖動物疾病的過程中，沒有真正做到科學(xué)、規(guī)范、精準(zhǔn)地使用水產(chǎn)用獸藥的緣故，這可能才是導(dǎo)致“國標(biāo)漁藥”治療水產(chǎn)養(yǎng)殖動物疾病失敗的重要原因。

要做到科學(xué)、規(guī)范、精準(zhǔn)地使用水產(chǎn)用獸藥，也許是唯一的途徑和有效方法，就是從患病水產(chǎn)養(yǎng)殖動物中獲得致病性生物、針對致病生物完成藥物敏感性檢測后，根據(jù)藥敏實驗檢測結(jié)果，計算用藥劑量，做到精準(zhǔn)用藥。

因為水產(chǎn)養(yǎng)殖動物致病性生物對“國標(biāo)漁藥”的耐藥性也是在不斷地變化的，而采用“國標(biāo)漁藥”治療水產(chǎn)養(yǎng)殖動物的各種傳染性疾病，也是需要滿足“量-效關(guān)系”的。而只有針對引起水產(chǎn)養(yǎng)殖動物疾病的致病性病原，完成其對水產(chǎn)用獸藥的敏感性檢測后，才可能做到精準(zhǔn)確定用藥劑量和科學(xué)、規(guī)范、精準(zhǔn)地使用水產(chǎn)用獸藥。

兩例養(yǎng)殖大口黑鱸細菌性

疾病的診治過程簡介

摘要：本文內(nèi)容是簡要地介紹了來自武漢和廣東地區(qū)2例養(yǎng)殖大口黑鱸（Micropterus salmoides）細菌性疾病診治過程。實驗室在接收到由廣東和武漢水產(chǎn)養(yǎng)殖區(qū)域送來的患病大口黑鱸后，首先，從患病魚體的腎臟、肝臟中分離、純化到分離菌株；接著，利用獲得的分離菌株完成了對水產(chǎn)用抗微生物獸藥的敏感性檢測實驗；最后，根據(jù)分離菌株對水產(chǎn)用抗微生物獸藥敏感性的檢測結(jié)果，選擇治療患病大口黑鱸的獸藥并確定用藥劑量，籍以指導(dǎo)大口黑鱸養(yǎng)殖業(yè)者實施精準(zhǔn)用藥。

根據(jù)大口黑鱸養(yǎng)殖業(yè)者回饋的信息，藥物治療患病大口黑鱸均取得了良好的治療效果。診治患病大口黑鱸細菌性疾病的結(jié)果說明，從體表呈現(xiàn)“潰瘍病”癥狀的大口黑鱸體內(nèi)可分離到2種致病性細菌，敬種屬鑒定分別屬于燦爛弧菌（Vibrio splendidus）和星狀諾卡氏菌（Vibrio splendidus）。根據(jù)對2種致病性菌株的藥敏實驗結(jié)果，篩選到適宜的水產(chǎn)用抗微生物獸藥后，實施精準(zhǔn)用藥就能有效地治療患病大口黑鱸細菌性疾病。證明所采用的診治患病大口黑鱸細菌性疾病的技術(shù)措施與操作程序，對于提高對患病水產(chǎn)養(yǎng)殖動物疾病的藥物療效，避免水產(chǎn)用獸藥對水產(chǎn)養(yǎng)殖環(huán)境和水產(chǎn)養(yǎng)殖動物的污染，都是具有重要作用的。

關(guān)鍵詞：大口黑鱸；潰瘍病；抗微生物藥物；藥敏實驗；精準(zhǔn)用藥

大口黑鱸（Micropterus salmoides）在養(yǎng)殖過程中，可能遭受多種致病性細菌引起傳染性疾病的危害。無論是在國內(nèi)還是國外，對于養(yǎng)殖大口黑鱸的細菌性疾病，主要是依靠各種抗微生物獸藥進行治療。

如何做到對患細菌性疾病的大口黑鱸實施有效地藥物治療，在我國的水產(chǎn)養(yǎng)殖動物疾病治療過程中，的確是還存在著因為盲目用藥而導(dǎo)致藥物治療效果欠佳的問題。只有做到科學(xué)、精準(zhǔn)地使用水產(chǎn)用獸藥，才有可能實現(xiàn)藥物的有效治療。這篇小文章的內(nèi)容，就是總結(jié)對來自武漢和廣東養(yǎng)殖區(qū)域患病大口黑鱸細菌性疾病的診治過程，旨在為廣大的水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)者診治水產(chǎn)養(yǎng)殖動物疾病時，提供選擇診治方法與措施的參考。

1.材料與方法

1.1患病大口黑鱸的來源與體表癥狀

在本實驗中采用的患病大口黑鱸，由武漢和廣東的水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)者送來實驗室請求診治疾病的魚體。肉眼檢查病魚體表可見存在典型的“潰瘍病”癥狀（圖1）。解剖患病大口黑鱸檢查時，可見其病魚肝胰臟內(nèi)存在大量白色結(jié)節(jié)（圖2）。

圖1示患病大口黑鱸體表呈現(xiàn)出“潰瘍病”的癥狀

圖2示解剖后患病大口黑鱸肝胰臟內(nèi)存在的白色結(jié)節(jié)狀況

1.2致病性菌株的分離

在無菌條件下，采用微生物學(xué)方法，從送來實驗室委托診治疾病的患病大口黑鱸腎臟和肝胰臟中挑取致病菌，接種在盛裝有腦心浸液瓊脂培養(yǎng)基（BHIA，Difco）平皿中，將接種細菌的培養(yǎng)皿置于28.0℃恒溫培養(yǎng)箱中，培養(yǎng)48.0h后，再從長出菌落的培養(yǎng)皿中挑取單個菌落，接種在盛裝有BHIA培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿中，完成分離菌株的純化培養(yǎng)過程。

1.3抗微生物獸藥對分離菌株的最小抑菌濃度（MIC）測定

參照日本化學(xué)療法學(xué)會制定的標(biāo)準(zhǔn)法，采用10.0%硫酸黏菌素可溶性粉等14種抗微生物獸藥作為供試藥物。采用適宜溶媒將各種獸藥預(yù)溶后，用滅菌生理鹽水按照上述制劑中抗微生物藥物的含量，分別稀釋至1000~0.20mg/L的２倍稀釋的系列藥物濃度。然后用腦心浸液培養(yǎng)基（BHI，Difco）將各濃度的藥物液稀釋10倍，從而使培養(yǎng)基中的各種藥物的濃度達到100.0~0.025mg/L的２倍稀釋的濃度。最后向每支盛有2.9mL培養(yǎng)基的試管中加入0.1 mL濃度為1.0×106cfu/mL活菌液，在28℃條件下連續(xù)培養(yǎng)3d，經(jīng)肉眼觀察證實無細菌生長試管中的最低藥物濃度，即為抗微生物藥物對分離菌株的最小抑菌濃度（minimal inhibitory concentration，MIC）。

1.4篩選治療藥物及用藥程序

從來自不同地的患病大口黑鱸體內(nèi)獲得部分分離菌株，完成對各種水產(chǎn)用抗微生物獸藥的藥敏實驗中獲得的MIC，分別選擇到抑菌效果良好的10.0%恩諾沙星粉和10.0%阿莫西林可溶性粉，分別作為治療武漢和廣東養(yǎng)殖區(qū)域患病大口黑鱸疾病的藥物，參照日本學(xué)者對藥物治療養(yǎng)殖黑鯛（Sparus macrocephalus）細菌性疾病的用藥系數(shù)（6.3），計算出水產(chǎn)用抗微生物獸藥的用藥量，添加在大口黑鱸飼料中制備藥物飼料。每天投喂1次藥物飼料，連續(xù)投喂7d為一個用藥療程。

2.結(jié)果

2.1抗微生物獸藥對分離菌株的MIC

利用從患病大口黑鱸體內(nèi)獲得的部分分離菌株，測定了其對抗微生物獸藥的MIC，結(jié)果如表1所示。由表1所示結(jié)果，可以看出不同分離菌株對各種抗微生物獸藥的MIC存在明顯差異。

2.2藥物治療疾病效果

根據(jù)分離菌株對各種抗微生物獸藥的藥敏實驗中獲得的MIC，分別選擇到抑菌效果良好的10.0%恩諾沙星粉和10.0%阿莫西林可溶性粉，作為治療武漢和廣東養(yǎng)殖區(qū)域患病大口黑鱸細菌性疾病的藥物，參照日本學(xué)者對藥物治療養(yǎng)殖黑鯛（Sparus macrocephalus）細菌性疾病的用藥系數(shù)（6.3），計算出抗微生物獸藥的用藥量，添加在大口黑鱸飼料中制備藥物飼料。每天投喂1次藥物飼料，連續(xù)投喂7d為一個用藥療程。

根據(jù)送檢患病大口黑鱸的養(yǎng)殖業(yè)者回饋給我們的信息，對患病大口黑鱸均獲得了良好藥物治療結(jié)果。

2.3對分離菌株的種屬鑒定

從2024年8月至2025年3月，將從武漢和廣東送來實驗室委托診治疾病的大口黑鱸體內(nèi)共分離純化20多個分離菌株，從中隨機選取12個分離菌株，送到中國水產(chǎn)科研究院長江水產(chǎn)研究所，委托相關(guān)研究人員協(xié)助鑒定分離菌株的所屬的種屬。

利用16s rDNA分析技術(shù)，對分離菌株進行基因組DNA提取后，進行PCR擴增并進行序列分析后的，從來自武漢地區(qū)的患病大口黑鱸體內(nèi)獲得的分離菌株，鑒定為燦爛弧菌（Vibrio splendidus），而來自廣東的患病大口黑鱸體內(nèi)獲得的分離菌株，鑒定為星狀諾卡氏菌（Vibrio splendidus）。

3.討論

隨著我國的水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)持續(xù)朝著高密度、集約化養(yǎng)殖方式發(fā)展，養(yǎng)殖水體環(huán)境中有機物污染日益嚴(yán)重，水產(chǎn)養(yǎng)殖動物各種傳傳染性疾病頻繁地發(fā)生與流行，已經(jīng)成為嚴(yán)重影響我國水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)健康、綠色與可持續(xù)發(fā)展的主要制約因素。

尤其是因為我國水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)者在治療水產(chǎn)養(yǎng)殖動物的細菌性疾病時，由于長期以來均存在用藥不規(guī)范等問題，導(dǎo)致致病性細菌對我國水產(chǎn)用抗微生物獸藥已經(jīng)產(chǎn)生了嚴(yán)重的耐藥性（Drug resistance）。當(dāng)水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)者在采用抗微生物獸藥治療患病水產(chǎn)養(yǎng)殖動物細菌性疾病的過程中，難以獲得有效的治療效果。

本文簡要介紹的對養(yǎng)殖大口黑鱸細菌性疾病診治過程的目的，是強調(diào)在藥物治療水產(chǎn)養(yǎng)殖動物疾病時，要做到避免只是根據(jù)獸藥說明書選擇和確定用藥劑量，而是要依照如下診治疾病的程序：首先從患病魚體內(nèi)獲得分離菌株，接著利用分離菌株完成對水產(chǎn)用抗微生物獸藥的敏感性檢測實驗，最后根據(jù)分離菌株對供試抗微生物獸藥敏感性的檢測結(jié)果，選用能有效抑制分離菌株的抗微生物獸藥，并且根據(jù)MIC確定用藥劑量后，指導(dǎo)大口黑鱸養(yǎng)殖業(yè)者在治療患病水產(chǎn)養(yǎng)殖動物中實現(xiàn)精準(zhǔn)用藥。分別對武漢和廣東的養(yǎng)殖大口黑鱸細菌性疾病，按照上述程序選擇獸藥和確定用藥劑量的藥物治療結(jié)果證明，這種診療程序?qū)τ诖_保藥物治療患病水產(chǎn)養(yǎng)殖動物疾病的療效，是具有重要現(xiàn)實意義的。

投稿聯(lián)系鄭記者

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本文版權(quán)屬于南方農(nóng)村報、農(nóng)財寶典大國漁業(yè)，未經(jīng)授權(quán)，謝絕轉(zhuǎn)載。

作者：華中農(nóng)業(yè)大學(xué)陳昌福；武漢科研時代生物技術(shù)有限公司周鑫軍。

編輯：鄭燕云

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