好書推薦!《動(dòng)物行為實(shí)驗(yàn)指南》電子版pdf,網(wǎng)盤發(fā)貨

動(dòng)物行為實(shí)驗(yàn)指南》共674頁(yè),涵蓋了常見的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物,如小鼠、大鼠和斑馬魚,詳細(xì)描述了每一種行為測(cè)試的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)、測(cè)試設(shè)備、實(shí)驗(yàn)流程、評(píng)估指標(biāo)、預(yù)期結(jié)果、常見問題及解決方法、數(shù)據(jù)分析、模型應(yīng)用與局限性等各個(gè)方面。它通過快速引導(dǎo),幫助研究人員高效地掌握實(shí)驗(yàn)的每個(gè)階段,減少了查閱文獻(xiàn)和尋找方法的時(shí)間,成為各類科研人員的重要參考資料。 《動(dòng)物行為實(shí)驗(yàn)指南》共計(jì)收錄了16種動(dòng)物行為類型,包括焦慮抑郁、學(xué)習(xí)記憶、痛覺、運(yùn)動(dòng)、恐懼、社交、癲癇、操作、成癮、視覺、癢覺、味覺、嗅覺、睡眠、斑馬魚行為以及常見動(dòng)物模型等內(nèi)容。每一類動(dòng)物行為下,都詳細(xì)介紹了多個(gè)經(jīng)典的實(shí)驗(yàn)范式,涵蓋了超過100種實(shí)驗(yàn)方法。 www.behaviewer.com

在大多數(shù)患者中,缺血性中風(fēng)是由大腦中動(dòng)脈(MCA)的閉塞引起的。因此,已經(jīng)開發(fā)了嚙齒動(dòng)物模型來模擬人類局灶性缺血性中風(fēng)。最廣泛使用的大鼠局灶性腦缺血模型涉及通過內(nèi)插縫合線方法閉塞MCA(MCAO)。

頸總動(dòng)脈插線法進(jìn)行大腦中動(dòng)脈栓塞大鼠造模:

選用健康的成年大鼠,體重一般在250-350g左右,常用的品系有SD大鼠、Wistar大鼠等。腹腔注射麻醉大鼠,待大鼠麻醉后,將其仰臥位固定于手術(shù)臺(tái)上。用碘伏對(duì)大鼠頸部皮膚進(jìn)行消毒,鋪無(wú)菌巾,暴露手術(shù)視野。在頸部正中做一縱行切口,長(zhǎng)度約2-3cm,依次切開皮膚、皮下組織,鈍性分離肌肉,暴露右側(cè)頸總動(dòng)脈(CCA)、頸外動(dòng)脈(ECA)和頸內(nèi)動(dòng)脈(ICA)。小心分離出CCA、ECA和ICA,注意避免損傷周圍的神經(jīng)和血管,分別用絲線在CCA近心端和ECA遠(yuǎn)心端打活結(jié)備用。在ECA與ICA分叉處下方剪一小口,將尼龍線(通常直徑為0.20-0.26mm)的一端插入切口,沿ICA緩慢插入。插入深度一般根據(jù)大鼠體重和品系而定,通常在18-20mm左右,直到感覺到輕微阻力,此時(shí)尼龍線的頭端應(yīng)到達(dá)大腦中動(dòng)脈起始部,阻塞大腦中動(dòng)脈血流,造成局灶性腦缺血。將ECA上的絲線扎緊,固定尼龍線,防止其滑出。用生理鹽水沖洗手術(shù)部位,檢查無(wú)出血后,依次縫合肌肉、皮下組織和皮膚。將大鼠置于溫暖、安靜的環(huán)境中,待其自然蘇醒。密切觀察大鼠的生命體征,如呼吸、心跳、體溫等,以及神經(jīng)功能缺損癥狀,如肢體偏癱、行走不穩(wěn)等。術(shù)后給予大鼠適量的抗生素(如青霉素等)預(yù)防感染,同時(shí)給予適量的生理鹽水補(bǔ)液,維持水鹽平衡。假手術(shù)組與模型組予同步灌胃等劑量的生理鹽水,3次/d,連續(xù)7d。

行為學(xué)觀察:

肢體運(yùn)動(dòng)功能:正常大鼠行走自如、肢體活動(dòng)協(xié)調(diào)。造模成功的大鼠會(huì)出現(xiàn)明顯的對(duì)側(cè)肢體偏癱,表現(xiàn)為行走時(shí)向患側(cè)轉(zhuǎn)圈、拖拽患側(cè)肢體,甚至無(wú)法自主活動(dòng)患側(cè)肢體,如將大鼠放置于水平棒上,正常大鼠能在棒上平穩(wěn)行走,而模型成功的大鼠則會(huì)因肢體無(wú)力而掉落。

平衡能力與協(xié)調(diào)能力:通過平衡木實(shí)驗(yàn)或轉(zhuǎn)棒實(shí)驗(yàn)來評(píng)估。正常大鼠在平衡木上能保持平衡并順利通過,模型成功的大鼠則會(huì)出現(xiàn)平衡失調(diào),難以在平衡木上站穩(wěn)或行走,在轉(zhuǎn)棒上也會(huì)因肢體不協(xié)調(diào)而快速掉落。

神經(jīng)功能評(píng)分:

Longa評(píng)分法:是目前常用的評(píng)估方法之一。根據(jù)大鼠的行為表現(xiàn)進(jìn)行評(píng)分,0分表示無(wú)神經(jīng)功能缺損癥狀;1分表示不能完全伸展對(duì)側(cè)前爪;2分表示向?qū)?cè)轉(zhuǎn)圈;3分表示向?qū)?cè)傾倒;4分表示不能自發(fā)行走,意識(shí)喪失。一般認(rèn)為評(píng)分在1-4分的大鼠造模成功。

Bederson評(píng)分法:也較為常用。通過觀察大鼠的提尾時(shí)的肢體狀態(tài)、行走時(shí)的姿勢(shì)等進(jìn)行評(píng)分,總分為5分,分?jǐn)?shù)越高表示神經(jīng)功能缺損越嚴(yán)重,通常評(píng)分在3-5分提示造模成功。

影像學(xué)檢查:

磁共振成像(MRI):能夠清晰顯示腦部結(jié)構(gòu)和缺血區(qū)域。在T2加權(quán)像或彌散加權(quán)像上,可觀察到大腦中動(dòng)脈供血區(qū)域出現(xiàn)高信號(hào)影,提示腦組織缺血、梗死,若出現(xiàn)此典型影像學(xué)改變,則表明造模成功。

計(jì)算機(jī)斷層掃描(CT):可顯示腦部的大致解剖結(jié)構(gòu)。在造模成功的大鼠腦CT圖像上,可看到大腦中動(dòng)脈供血區(qū)出現(xiàn)低密度影,提示腦組織缺血性改變。

腦組織病理學(xué)檢查:

大體標(biāo)本觀察:在造模后一定時(shí)間點(diǎn)處死大鼠,取出腦組織,肉眼觀察可見大腦中動(dòng)脈供血區(qū)域的腦組織出現(xiàn)蒼白、腫脹,嚴(yán)重時(shí)可見梗死灶形成,與周圍正常腦組織界限較清晰。

蘇木精-伊紅(H&E)染色:光鏡下觀察,造模成功的大鼠大腦中動(dòng)脈供血區(qū)的腦組織出現(xiàn)神經(jīng)元變性、壞死,細(xì)胞形態(tài)不規(guī)則,細(xì)胞核固縮、深染,細(xì)胞間隙增大,還可見到炎性細(xì)胞浸潤(rùn)等病理改變。

生理指標(biāo)監(jiān)測(cè):

局部腦血流監(jiān)測(cè):在造模前后及過程中,使用激光多普勒血流儀等設(shè)備監(jiān)測(cè)大腦中動(dòng)脈供血區(qū)域的局部腦血流。造模成功時(shí),該區(qū)域的腦血流會(huì)明顯減少,一般降至基礎(chǔ)值的20%-40%左右。

腦電圖(EEG):造模成功的大鼠腦電圖會(huì)出現(xiàn)異常改變,如波幅降低、頻率減慢,以及出現(xiàn)癇樣放電等,反映了腦組織的功能狀態(tài)異常。

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