都說(shuō)養(yǎng)細(xì)胞等于養(yǎng)了個(gè)「孩子」，從此以后你的衣食住行、生活起居中都夾帶著看「孩子」、給「孩子」喂飯、管理「孩子」的社交等雜事瑣事。
然而這個(gè)科研界的「好大兒」實(shí)驗(yàn)，卻異常矯情，能讓科研人磨礪出其他實(shí)驗(yàn)帶不來(lái)的美德。
孝順：細(xì)胞在不遠(yuǎn)游，讓你體驗(yàn)一下母慈子孝的感覺(jué)。
堅(jiān)持：一次培養(yǎng)至少要花上兩周，讓你磨礪心性、成就大我
創(chuàng)新：只要有創(chuàng)意和勇氣，你的培養(yǎng)皿里就能出現(xiàn)任意污染源
穩(wěn)重：實(shí)驗(yàn)室發(fā)了 50 篇 SCI 的細(xì)胞被我親手養(yǎng)死了
勇敢：因用錯(cuò)細(xì)胞系，導(dǎo)致課題組被瘋狂撤稿
一次細(xì)胞培養(yǎng)至少小半個(gè)月，長(zhǎng)的話可能要耗費(fèi) 2 個(gè)月，從復(fù)蘇到傳代再到換液、分化，都需要小心翼翼。
有時(shí)候多看一眼它們，可能都會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞「交友不慎」，陷入污染....... 為此，學(xué)霸君為大家整理了 5 個(gè)「壞孩子」污染源頭的原因以及識(shí)別方式。
文末還附上了科研人細(xì)胞培養(yǎng)專項(xiàng)訓(xùn)練，一周跟練，讓你的細(xì)胞得到一致的品控。
細(xì)菌污染：顯微鏡下的 「小點(diǎn)點(diǎn)」
細(xì)菌污染會(huì)在培養(yǎng)基中形成微小的沉淀物，這些「小點(diǎn)」在顯微鏡下清晰可見(jiàn)。
此外，培養(yǎng)基的變色、渾濁度的提升、細(xì)胞形態(tài)的突變，以及細(xì)胞生長(zhǎng)速度的減緩，都是細(xì)菌污染的直接體現(xiàn)。
細(xì)菌污染的形態(tài)特征如下：
圖源：小紅書博主
圖源：自制
細(xì)菌污染主要因?yàn)?strong>實(shí)驗(yàn)人員在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中未能嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作規(guī)程。
如未能正確消毒或穿戴適當(dāng)?shù)膫€(gè)人防護(hù)裝備，導(dǎo)致細(xì)菌通過(guò)皮膚、毛發(fā)或呼吸帶入培養(yǎng)環(huán)境中。
此外，實(shí)驗(yàn)室環(huán)境若未定期清潔消毒，或使用的培養(yǎng)基和試劑本身存在污染，也易引發(fā)細(xì)菌污染。
真菌污染：培養(yǎng)基上的 「細(xì)絲線」
真菌污染會(huì)在培養(yǎng)基表面形成絲狀或絮狀物，這些「絲線」 是真菌生長(zhǎng)的明顯標(biāo)志。
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真菌污染往往與實(shí)驗(yàn)室環(huán)境的濕度和通風(fēng)條件有關(guān)，高濕度環(huán)境有利于真菌孢子的生長(zhǎng)和繁殖。
使用受污染的培養(yǎng)基或血清，或?qū)嶒?yàn)器材未經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的消毒程序，也可能成為真菌污染的來(lái)源。
支原體污染：看不見(jiàn)的 「隱形者」
支原體污染難以通過(guò)光學(xué)顯微鏡觀察，但它們會(huì)讓細(xì)胞生長(zhǎng)速度減慢，需要通過(guò) PCR 等分子生物學(xué)方法來(lái)檢測(cè)。
如果你發(fā)現(xiàn)以下征兆，又看不出明顯的培養(yǎng)基變化，則可能為支原體污染。
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支原體污染的一個(gè)主要原因是其體積微小，能夠穿透常規(guī)的過(guò)濾膜，因此，在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中難以通過(guò)過(guò)濾手段去除。
病毒污染：細(xì)胞的惡性「病變」
病毒污染會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)異常的細(xì)胞病理效應(yīng)，如細(xì)胞融合或形成合胞體，這些變化在顯微鏡下容易識(shí)別。
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病毒污染通常因?yàn)榧?xì)胞培養(yǎng)物與受污染的生物材料接觸，如使用未經(jīng)充分篩選或驗(yàn)證的血清、血漿或細(xì)胞系，這些材料可能攜帶病毒或病毒核酸。
此外，實(shí)驗(yàn)室人員在操作過(guò)程中未能遵循嚴(yán)格的無(wú)菌技術(shù)，或?qū)嶒?yàn)室環(huán)境中存在病毒污染源。如受污染的設(shè)備或工作臺(tái)面，也可能導(dǎo)致病毒污染。
細(xì)胞交叉污染：發(fā)生形態(tài)的「異變」
細(xì)胞交叉污染會(huì)讓細(xì)胞形態(tài)發(fā)生改變，如細(xì)胞變大或變小，這些「異變」 在顯微鏡下可以觀察到。
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交叉污染往往發(fā)生在細(xì)胞培養(yǎng)操作中，由于不同細(xì)胞系或株之間的直接接觸，或使用未經(jīng)徹底消毒的共享設(shè)備和耗材。
此外，實(shí)驗(yàn)室人員在處理多個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)物時(shí)未更換手套或工具，或在不同細(xì)胞培養(yǎng)間未采取適當(dāng)?shù)母綦x措施，都可能引起交叉污染。
交叉污染還可能源于細(xì)胞培養(yǎng)物的誤標(biāo)記或混淆，導(dǎo)致不準(zhǔn)確的細(xì)胞系識(shí)別和使用。
這讓珍貴細(xì)胞系「掉價(jià)」，便宜細(xì)胞系「鳩占鵲巢」，最后，讓實(shí)驗(yàn)結(jié)果統(tǒng)統(tǒng)無(wú)效，結(jié)果要多慘痛就有多慘痛！
最后，環(huán)境因素如灰塵、不潔的設(shè)備等也可能導(dǎo)致細(xì)胞污染，需要大家保持實(shí)驗(yàn)室的清潔和無(wú)菌，給孩子打造一個(gè)良好的生存環(huán)境。
科研人細(xì)胞培養(yǎng)專項(xiàng)訓(xùn)練！
學(xué)霸君為科研人員準(zhǔn)備了一份細(xì)胞培養(yǎng)專項(xiàng)訓(xùn)練計(jì)劃，一周跟練，讓你的細(xì)胞培養(yǎng)技藝更上一層樓，確保細(xì)胞得到一致的品控～
一周訓(xùn)練內(nèi)容如下：
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通過(guò)本文的介紹，學(xué)霸君希望你能對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)有更深的了解，掌握污染的識(shí)別與處理方法，讓你的「好大兒」培養(yǎng)之路更加順暢。
記住，每一盤優(yōu)質(zhì)的細(xì)胞背后，都有一個(gè)細(xì)心呵護(hù)細(xì)胞的科研爸媽。
題圖來(lái)源：圖蟲(chóng)創(chuàng)意
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