Western Blot（WB）作為分子生物學的經(jīng)典實驗技術，幾乎是每一位生物學霸的必修課。它不僅可以檢測目標蛋白的表達情況，還能通過條帶的強弱、位置等信息，為研究提供關鍵線索。
不過，WB 實驗有時能讓你欲哭無淚。今天學霸君整理了一些當代 WB「瘋癲」作品集，順便分享一些經(jīng)驗教訓，希望對正在實驗室里「摸魚」的你有所幫助。
類型一：表情包型結果
跑出驚嘆號（!）
網(wǎng)友投稿自己的 WB 結果，像一個大大的驚嘆號，條帶清晰，但一點用沒有。這可能是因為蛋白表達量過高，或者上樣量過多導致的。
圖源：網(wǎng)絡
原因——
蛋白上樣量過多，導致條帶過于集中。
目標蛋白本身表達量過高，掩蓋了其他條帶。
建議——
適當減少蛋白上樣量，或者對樣品進行稀釋后再上樣。
如果目標蛋白本身就高表達，可以嘗試降低抗體濃度，避免過度顯色。
跑出鬼臉（-V-）
有的結果看起來像是在做鬼臉，條帶扭曲、變形，甚至可能出現(xiàn)奇怪的形狀。這通常是由于電泳條件不穩(wěn)定，或者轉(zhuǎn)膜過程中出現(xiàn)問題。
比如，電泳電壓過高、時間過長，或者轉(zhuǎn)膜時電流過大，都會讓條帶變得 「面目全非」。
圖源：網(wǎng)絡
原因——
電泳電壓過高或時間過長，導致條帶變形。
轉(zhuǎn)膜時電流過大或轉(zhuǎn)膜時間過長，導致條帶扭曲。
建議——
降低電泳電壓和時間，確保電泳條件穩(wěn)定。
在轉(zhuǎn)膜時檢查電極方向是否正確，避免電流過大。
使用麗春紅 S 染色檢測轉(zhuǎn)膜是否完全
類型二：2B 型結果
并不是在罵人哈，而是條帶宛如 2B 涂卡筆型，糊成一片，背景高到幾乎看不到目標條帶，就像是一張被涂黑的試卷，讓人無從下手。
圖源：網(wǎng)絡
原因——
抗體濃度過高，導致非特異性結合增加。
孵育時間過長，背景信號增強。
封閉不充分，膜表面未完全封閉，導致抗體非特異性結合。
建議——
降低抗體濃度，建議進行梯度稀釋以找到最佳濃度。
縮短孵育時間，避免過度孵育。
延長封閉時間（建議 1 小時以上），并確保封閉液（如 5% 脫脂奶粉或 BSA）新鮮且均勻覆蓋膜表面
類型三：藝術型結果
水墨畫
水墨畫型結果偶爾會出現(xiàn)，稍顯「隨性」，條帶可能沒有那么清晰，但整體效果依然很美，給自己的作品定一個億的價格不過分吧
圖源：網(wǎng)絡
原因——
抗體特異性稍差，或樣品中存在非特異性蛋白。
建議——
選擇特異性更高的抗體，或在樣品處理時加入蛋白酶抑制劑。
如果背景仍然較高，可以嘗試延長封閉時間或降低抗體濃度。
抽象藝術畫
有的結果看起來像是抽象派藝術畫作，條帶形狀奇特、位置不規(guī)則，甚至可能出現(xiàn)一個黑色的「大泡泡」。
圖源：網(wǎng)絡
原因——
轉(zhuǎn)膜時氣泡：膜和凝膠之間存在氣泡，導致顯色異常。
膜或凝膠未充分浸潤：局部電流集中，形成顯色圈。
緩沖液不足或不均勻：導致局部電流異常。
建議——
排除氣泡：轉(zhuǎn)膜前確保膜和凝膠緊密貼合，無氣泡。
充分浸潤：確保膜和凝膠完全浸潤在緩沖液中。
脫氣緩沖液：轉(zhuǎn)膜緩沖液使用前脫氣處理。
保持濕潤：實驗過程中避免膜干燥。
優(yōu)化條件：適當調(diào)整轉(zhuǎn)膜時間和電流。
類型四：貓貓型結果
雖然不能用，但很可愛，有兩個角角。這種結果可能是由于蛋白降解，或者樣品處理不當，導致條帶出現(xiàn)奇怪的形狀。
圖源：網(wǎng)絡
原因——
蛋白降解：樣品在處理或保存過程中發(fā)生降解，導致條帶出現(xiàn)碎片化或異常形狀。
裂解條件不當：裂解液配方或裂解時間不合適，導致蛋白過度降解或變性。
樣品保存不當：樣品在保存過程中未保持低溫或未添加足夠的蛋白酶抑制劑。
建議——
加入蛋白酶抑制劑：在樣品裂解時加入適量的蛋白酶抑制劑（如 PMSF、EDTA 等），以防止蛋白降解。
優(yōu)化裂解條件：調(diào)整裂解液配方或裂解時間，確保蛋白在裂解過程中保持穩(wěn)定。
今天 WB 結果圖大賞就到這了，你是否也經(jīng)歷過類似的「藝術級 」WB 結果，以下這些結果你都「解鎖」過哪些呢？
速來投票?。?/strong>
如果你還有其他有趣的結果，也歡迎分享你的「WB 藝術作品」！一起交流經(jīng)驗，早日告別「瘋癲」條帶，擁抱「夢中情帶」！
題圖來源：圖蟲創(chuàng)意
我們長期為科研用戶提供前沿資訊、實驗方法、選品推薦等服務，并且組建了 70 多個不同領域的專業(yè)交流群，覆蓋PCR、細胞實驗、蛋白研究、神經(jīng)科學、腫瘤免疫、基因編輯、外泌體、類器官等領域，定期分享實驗干貨、文獻解讀等活動。
添加實驗菌企微，回復【】中的序號，即可領取對應的資料包哦～
【2401】論文寫作干貨資料（100 頁）
【2402】國內(nèi)重點實驗室分子生物學實驗方法匯總（60 頁）
【2403】2024 最新最全影響因子（20000+ 期刊目錄）
【2404】免疫學信號通路手冊
【2405】PCR 實驗 protocol 匯總
【2406】免疫熒光實驗 protocol 合集
【2407】細胞培養(yǎng)手冊
【2408】蛋白純化實驗手冊
【2501】染色體分析方法匯總
【2502】國自然中標標書模板
【2503】WB 實驗詳解及常見問題解答
【2504】DeepSeek 論文寫作常用口令
【2505】中國科學院期刊分區(qū)表（2025 年最新版）
熱門跟貼