轉(zhuǎn)自:諾唯贊生物

專題介紹

細(xì)胞作為生命活動(dòng)的基本結(jié)構(gòu)和功能單元,從誕生到消亡都遵循著精密調(diào)控的生命程序,細(xì)胞周期、增殖、衰老與凋亡共同維持生命動(dòng)態(tài)平衡。本系列專題將深入解碼細(xì)胞死亡,助你輕松拿捏細(xì)胞生物學(xué)研究!

首期帶你讀懂“細(xì)胞死亡”,并附上精簡(jiǎn)版流式分析攻略!

下期將帶你掌握“細(xì)胞增殖 ”核心要點(diǎn),敬請(qǐng)持續(xù)關(guān)注!

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細(xì)胞死亡對(duì)于生命為何如此重要?

細(xì)胞死亡是生命體中不可或缺的自然過(guò)程,通過(guò)一系列有序的生物學(xué)過(guò)程,清除受損、衰老或不再需要的細(xì)胞,是維持生物體健康和內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定的關(guān)鍵機(jī)制。當(dāng)調(diào)控機(jī)制失靈時(shí),細(xì)胞過(guò)度激活凋亡則可能引發(fā)神經(jīng)退行性疾病。理解這些生命節(jié)律的調(diào)控密碼,解析疾病發(fā)生過(guò)程中特定死亡通路的狀態(tài),或許能為人類打開延緩衰老、治療疾病的新窗口。

細(xì)胞“花樣”死亡方式怎么區(qū)分?一表全解答不同的細(xì)胞死亡方式有其特異的特征及檢測(cè)方法,一起來(lái)了解~

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流式分析怎么做?

流式細(xì)胞術(shù)因其高效、定量、多參數(shù)的優(yōu)勢(shì),成為科研人研究細(xì)胞的首選工具!流式分析三步走,小白也能輕松搞定復(fù)雜數(shù)據(jù)圖!

流式分析簡(jiǎn)版(Annexin V法凋亡檢測(cè)為例)

圈門邏輯:

去細(xì)胞碎片去黏連死細(xì)胞根據(jù)熒光通道分析

去細(xì)胞碎片

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橫坐標(biāo)(FSC-A),反映細(xì)胞大小;縱坐標(biāo)(SSC-A),反映細(xì)胞內(nèi)部復(fù)雜性。

? 小細(xì)胞和碎片:FSC-A 值低,SSC-A 值低。

? 大細(xì)胞:FSC-A 值高,SSC-A 值高。

? 內(nèi)部結(jié)構(gòu)復(fù)雜的細(xì)胞:SSC-A 值高,但 FSC-A 值不一定高。

去黏連死細(xì)胞

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橫坐標(biāo)(FSC-A),更全面地反映了細(xì)胞的大??;縱坐標(biāo)(FSC-H),主要反映細(xì)胞的最大散射光強(qiáng)度,通常與細(xì)胞的直徑相關(guān)。? 正常單細(xì)胞的 FSC-A 和 FSC-H 值接近,而粘連體的 FSC-A 值會(huì)顯著大于 FSC-H 值,所以偏離對(duì)角線的且靠近FSC-A軸的細(xì)胞即為黏連細(xì)胞。

根據(jù)熒光通道分析

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需根據(jù)染料選擇橫縱坐標(biāo)。

橫坐標(biāo)(Annexin V-APC)APC-A,對(duì)應(yīng)熒光強(qiáng)度,APC-A 高即為陽(yáng)性;縱坐標(biāo)(PI)PE-A,對(duì)應(yīng)熒光強(qiáng)度,PE-A 高即為陽(yáng)性。

? 早期凋亡細(xì)胞:Annexin V-APC 陽(yáng)性(APC-A 高),PI 陰性(PE-A 低)。

? 晚期凋亡或壞死細(xì)胞:Annexin V-APC 陽(yáng)性(APC-A 高),PI 陽(yáng)性(PE-A 高)。

? 正常活細(xì)胞:Annexin V-APC 陰性(APC-A 低),PI 陰性(PE-A 低)

諾唯贊提供2種凋亡檢測(cè)試劑,精準(zhǔn)適配不同樣本:

? TUNEL法凋亡檢測(cè)試劑(A111/A112/A113),適用于石蠟切片、冰凍切片、細(xì)胞爬片和細(xì)胞涂片

? Annexin V法凋亡檢測(cè)試劑(A211/A213/A214),適用于貼壁或懸浮細(xì)胞,還可區(qū)分早凋和晚凋

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(轉(zhuǎn)自:諾唯贊生物)