好書推薦！《動物行為實驗指南》電子版pdf，網(wǎng)盤發(fā)貨
《動物行為實驗指南》共674頁，涵蓋了常見的實驗動物，如小鼠、大鼠和斑馬魚，詳細描述了每一種行為測試的實驗設計、測試設備、實驗流程、評估指標、預期結果、常見問題及解決方法、數(shù)據(jù)分析、模型應用與局限性等各個方面。它通過快速引導，幫助研究人員高效地掌握實驗的每個階段，減少了查閱文獻和尋找方法的時間，成為各類科研人員的重要參考資料。 《動物行為實驗指南》共計收錄了16種動物行為類型，包括焦慮抑郁、學習記憶、痛覺、運動、恐懼、社交、癲癇、操作、成癮、視覺、癢覺、味覺、嗅覺、睡眠、斑馬魚行為以及常見動物模型等內(nèi)容。每一類動物行為下，都詳細介紹了多個經(jīng)典的實驗范式，涵蓋了超過100種實驗方法。 www.behaviewer.com
7周雄性SD大鼠，飼養(yǎng)間適應7d，期間撫摸大鼠使其適應操作，食水不限。第8天9：00~17：00，進行造模。稱量大鼠，選擇合適的束縛器，將大鼠束縛2h后將大鼠放入水溫25℃、深35cm的強迫游泳桶中，強迫游泳20min，結束后使用毛巾進行干燥，休息15min后，使用異氟烷麻醉大鼠至意識喪失，休息20min；使用電擊箱進行電擊，電擊參數(shù)為15min內(nèi)，隨機電擊10次，每次電擊時長為6s，電流為1mA。電擊結束后將大鼠轉(zhuǎn)入動物房休息7d，期間不限食水，模型構建完成。
木僵實驗（freezing）
通常需要一個特制的實驗箱，例如一個透明的有機玻璃箱，大小適中，要保證大鼠有一定的活動空間，但也不能過大，一般長、寬、高可以在30-40厘米左右。箱子底部應該是平整的，以方便觀察大鼠的行為。
誘發(fā)木僵最常見的方法是通過環(huán)境應激或者條件刺激來誘發(fā)大鼠木僵。比如在條件性恐懼實驗中，當大鼠經(jīng)過聲音與電擊配對訓練后，再次單獨呈現(xiàn)聲音刺激時，大鼠可能會出現(xiàn)木僵狀態(tài)。這種木僵表現(xiàn)為除了呼吸等必要的生理活動外，身體長時間（數(shù)秒到數(shù)分鐘不等）保持靜止不動。
觀察指標：主要觀察大鼠的身體姿勢、肢體活動以及持續(xù)不動的時間。正常情況下，大鼠在沒有應激刺激時會比較活躍，在箱內(nèi)四處探索、嗅聞等。而處于木僵狀態(tài)的大鼠，身體可能會呈現(xiàn)蜷縮狀，四肢緊緊貼在身體兩側，并且在規(guī)定的觀察時間內(nèi)（如1-5分鐘）很少或者幾乎沒有肢體的移動。例如，在一些實驗中，當把大鼠放置在一個陌生且有潛在威脅線索（如捕食者氣味）的環(huán)境中，大鼠可能會因為恐懼而出現(xiàn)木僵行為，此時記錄其開始木僵的時間、木僵持續(xù)的時長以及木僵狀態(tài)下身體的具體姿勢等細節(jié)。記錄大鼠在測試過程中的不動時間，實驗指標為木僵時長百分比。木僵時長百分比（%）=木僵時間總測量時間×100%。
高架十字迷宮（Elevated Plus-Maze）測試
利用動物對新異環(huán)境的探究行為和天生的趨避沖突。正常大鼠會在開放臂和閉合臂之間有一定的探索時間平衡，而PTSD大鼠可能會因為焦慮等情緒變化而表現(xiàn)出對開放臂的回避增加。迷宮由兩條開放臂和兩條閉合臂組成，離地面有一定高度。將大鼠放置在迷宮中心區(qū)域，讓其自由探索5-10分鐘。記錄大鼠進入開放臂和閉合臂的次數(shù)、在各臂停留的時間等參數(shù)。一般來說，PTSD模型大鼠進入開放臂的次數(shù)和停留時間會明顯減少，更多地傾向于待在閉合臂，這表明其焦慮水平升高。
曠場實驗（Open-Field Test）
該實驗主要用于評估大鼠的自主活動和探索行為。在曠場中，大鼠的行為可以反映其情緒狀態(tài)和活動水平。PTSD大鼠可能會出現(xiàn)活動減少、在曠場邊緣停留時間增加等現(xiàn)象，這可能與焦慮和恐懼有關。將大鼠放置在一個方形的曠場裝置（如邊長1m左右的正方形箱子）內(nèi)，周圍有一定高度的圍墻。觀察記錄大鼠在曠場內(nèi)的活動軌跡、總移動距離、在中心區(qū)域和邊緣區(qū)域停留的時間等。正常大鼠會在曠場中比較活躍地探索，包括中心區(qū)域和邊緣區(qū)域，而PTSD模型大鼠可能活動范圍縮小，更多地在邊緣徘徊，并且總移動距離可能減少。
條件性恐懼（Fear Conditioning）測試
通過將一個中性刺激（如聲音或光照）與一個厭惡性刺激（如電擊）進行配對，使動物學會將中性刺激與恐懼聯(lián)系起來。在后續(xù)測試中，單獨呈現(xiàn)中性刺激時，觀察動物的恐懼反應。PTSD模型大鼠通常會表現(xiàn)出對條件刺激的恐懼記憶增強和消退困難。
訓練階段：將大鼠放置在一個特制的條件恐懼箱內(nèi)，先給予一個聲音（如80dB、30s的純音）作為條件刺激，隨后給予一個輕微的電擊（如0.5mA、2s）作為非條件刺激。經(jīng)過多次配對訓練后，大鼠會將聲音與電擊聯(lián)系起來。
測試階段：在訓練后的一段時間（如24小時或更長），將大鼠再次放回條件恐懼箱，只呈現(xiàn)聲音刺激，觀察大鼠的凍結行為（身體除呼吸外完全靜止）的時間。PTSD模型大鼠凍結行為的時間通常會比正常大鼠長，而且在經(jīng)過多次單獨呈現(xiàn)聲音刺激試圖消退恐懼記憶的過程中，PTSD大鼠的恐懼記憶消退更慢。
參考文獻：
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Single-Prolonged Stress: A Review of Two Decades of Progress in a Rodent Model of Post-traumatic Stress Disorder.[J]. Lisieski Michael J;;Eagle Andrew L;;Conti Alana C;;Liberzon Israel;;Perrine Shane A.Frontiers in psychiatry.2018
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