【寫在前面】：本期推薦的是由上海中醫(yī)藥大學(xué)附屬普陀醫(yī)院等研究團(tuán)隊合作近期發(fā)表于Phytomedicine(IF6.7）的一篇文章，揭示桃核承氣湯通過調(diào)節(jié)PHD2/UCP1和RIPK3/AKT/TGF-β通路減輕慢性腎功能衰竭。
【期刊簡介】
【題目及作者信息】
背景：慢性腎衰竭(CRF)是慢性腎臟疾病(CKD)發(fā)展的晚期階段。目前，沒有特定的臨床藥物可用。中醫(yī)藥作為一種整體治療方法，可能為改善慢性腎功能衰竭的臨床治療提供新的策略。
目的：本研究旨在探討桃核承氣湯對慢性腎功能衰竭的改善作用及其可能的機(jī)制。
方法：使用5/6腎切除術(shù)進(jìn)行動物實驗，以建立大鼠腎衰竭模型，并在連續(xù)8周通過管飼法給予低、中、高劑量(2、4和8 g/kg)的THCQD后，收集血清、尿液和腎臟樣品用于研究。用血管緊張素II(Ang II)或TGFβ刺激HK-2細(xì)胞產(chǎn)生與體內(nèi)腎功能衰竭相似的癥狀，進(jìn)行細(xì)胞實驗，以評價THCQD的改善作用和機(jī)制。本研究在明確THCQD湯化學(xué)成分的基礎(chǔ)上，利用基于質(zhì)譜的蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)探討了該病的發(fā)病機(jī)理，并利用親和超濾質(zhì)譜、表面等離子共振、DARTS、CETSA等技術(shù)探討了該化合物的藥理物質(zhì)基礎(chǔ)，并通過免疫印跡和免疫熒光染色實驗進(jìn)行了驗證。
結(jié)果：THCQD減輕CRF大鼠的腎損傷、腎纖維化和血清(尿或腎組織)中的氧化應(yīng)激指數(shù)。細(xì)胞實驗證實THCQD也保護(hù)HK-2細(xì)胞免受Ang II或TGF-β誘導(dǎo)的損傷。蛋白質(zhì)組學(xué)研究發(fā)現(xiàn)其作用機(jī)制與PHD2/UCP1和RIPK3/AKT/TGF-β途徑有關(guān)，并通過免疫印跡實驗進(jìn)行了驗證。此外，PHD2/UCP1和RIPK3/AKT/TGF-β途徑的藥效物質(zhì)基礎(chǔ)分別被AUF-MS、SPR、CETSA和DARTS證實為苦杏仁苷(Amy)和大黃酸(Rhe)。
結(jié)論：THCQD通過激活PHD2/UCP2介導(dǎo)的自噬和靶向RIPK3及其下游TGF-β途徑協(xié)同改善5/6腎切除誘導(dǎo)的慢性腎功能衰竭。上述信號通路協(xié)同作用的基礎(chǔ)分別是Amy和Rhe。
【前言】
慢性腎臟病(CKD)在慢性疾病的致殘率和死亡率中居首位，嚴(yán)重危害人類健康。有報道稱，全球有7億CKD患者，占全球人口的9.1%。慢性腎病的特點是起病隱匿，癥狀不明顯，因此很容易發(fā)展為慢性腎功能衰竭(CRF)。
CRF的主要臨床表現(xiàn)包括一系列癥狀，主要包括腎功能下降、腎小球濾過率下降、電解質(zhì)紊亂和酸堿失衡。慢性腎功能衰竭很難治療，預(yù)后不良。目前，臨床實踐通過干預(yù)飲食、控制血壓和減少蛋白尿來減緩CRF的進(jìn)展。然而，不存在特定的治愈藥物。因此，延緩慢性腎功能衰竭的進(jìn)展，降低終末期慢性腎功能衰竭的發(fā)病率，改善患者的臨床預(yù)后是一個迫切的公共衛(wèi)生問題和醫(yī)學(xué)挑戰(zhàn)。
CRF發(fā)病機(jī)制復(fù)雜，主要涉及腎間質(zhì)纖維化、蛋白尿加重、脂質(zhì)代謝異常、炎癥性氧化應(yīng)激等方面。在腎間質(zhì)纖維化中，細(xì)胞外基質(zhì)(ECM)的過度積聚、腎小管上皮細(xì)胞-間質(zhì)轉(zhuǎn)化(EMT)、炎癥因子的大量分泌加速了腎間質(zhì)纖維化的惡化。當(dāng)?shù)鞍啄蚣又貢r，腎小球濾過屏障損害和腎小管重吸收障礙是腎損傷的標(biāo)志，并加重病情。脂質(zhì)代謝異常表現(xiàn)為脂蛋白代謝障礙，可導(dǎo)致脂蛋白在腎臟沉積，改變原有的氧化應(yīng)激平衡，損害細(xì)胞功能。在炎癥性氧化應(yīng)激中，炎癥反應(yīng)釋放各種炎癥因子，激活細(xì)胞信號通路，導(dǎo)致腎細(xì)胞損傷，氧化應(yīng)激產(chǎn)生的活性氧也可加重?fù)p傷。而且炎癥和氧化應(yīng)激相互促進(jìn)，形成惡性循環(huán)。這些機(jī)制相互作用，共同促進(jìn)慢性腎功能衰竭的發(fā)生和發(fā)展。
桃核承氣湯由桃仁、大黃、桂枝、甘草和芒硝組成，為《傷寒論》經(jīng)典方劑。目前研究已證實其具有抗炎、免疫調(diào)節(jié)、改善血液流變學(xué)、改善腎間質(zhì)纖維化等藥理作用。THCQD目前已被報道在慢性腎臟疾病中顯示出積極的治療效果。然而，其作用機(jī)制尚不清楚。目前，通過5/6腎切除的方法建立了慢性腎功能衰竭大鼠模型，并對其療效進(jìn)行了評價。在此基礎(chǔ)上，本研究通過蛋白質(zhì)組學(xué)、AUF質(zhì)譜、表面等離子體共振等技術(shù)，探討了THCQD可能的作用靶點和作用機(jī)制，闡明了THCQD的主要成分。最后，研究發(fā)現(xiàn)THCQD通過激活PHD2/UCP2介導(dǎo)的細(xì)胞自噬和靶向RIPK3及其下游TGF-β途徑協(xié)同改善5/6腎切除誘導(dǎo)的CRF，協(xié)同作用分別基于桃仁的苦杏仁苷和大黃的大黃酸。
【結(jié)果部分】
1.THCQD的化學(xué)成分。
3.THCQD抑制5/6腎切除大鼠的腎纖維化。
4.THCQD對Ang II誘導(dǎo)的HK-2細(xì)胞損傷的保護(hù)作用。
5.THCQD通過UC P1/自噬和AKT/ TGF-β通路緩解慢性腎衰大鼠癥狀。
6.THCQD中對PHD2和RIPK3具有結(jié)合活性的成分的鑒定。
7.Rhe抑制HK-2細(xì)胞損傷的纖維化樣反應(yīng)。
8.Amy抑制HK-2細(xì)胞損傷的纖維化樣反應(yīng)。
【結(jié)論與討論】
本 實驗證實THCQD通過PHD2/UCP1和RIPK3/AKT/TGF-β信號通路促進(jìn)腎臟自噬，抑制腎臟纖維化進(jìn)程。THCQD的藥理物質(zhì)基礎(chǔ)中，Rhe通過RIPK3/AKT/TGF-β信號通路抑制炎癥反應(yīng)；Amy通過PHD2/UCP1信號通路抑制纖維化樣改變。因此，為THCQD作為慢性腎功能衰竭治療策略的藥理學(xué)潛力提供了有價值的見解。
注：本文原創(chuàng)表明為原創(chuàng)編譯，非聲張版權(quán)，侵刪！
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